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博莱霉素(Zeocin)和腐草霉素(Phleomycin)
□ 用途:筛选抗生素(selection antibiotic)
2.1 两种抗生素的基本介绍
腐草霉素(Phleomycin)是一种糖肽类抗生素,结构上类似于抗生素Bleomycin (BLM)。纯化的腐草霉素主要由腐草霉素D1(Phleomycin D1)(末端胺基是胍丁胺)以铜离子螯合和盐酸盐形式提供。腐草霉素阻断细胞周期进入S期,虽然腐草霉素类似于Bleomycin,能破坏DNA,但不用作一种抗肿瘤剂。目前腐草霉素的作用机理并未完全得以阐明,据报道由于修饰的二噻唑部分,其不能插入DNA。RAD6 DNA修复基因在突变酵母内对腐草霉素抗性是必须的。分子遗传实验中腐草霉素用作一种选择性抗生素,其具广谱的毒性,对细菌、真核微生物和植物和动物细胞呈体内活性。腐草霉素因此能用于鉴定和筛选含腐草霉素抗性基因比如Sh ble基因的各种细胞。
Zeocin?是博莱霉素/腐草霉素(bleomycin/phleomycin)抗生素家族的成员之一,从轮枝链霉菌Streptomyces verticillus中分离得到,对细菌、真菌(包括酵母菌)、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。Zeocin?是腐草霉素D1的商业名称,一种碱性、水溶性、铜离子螯合的糖肽抗生素。铜离子的存在使得溶液为蓝色,此铜螯合的形式为无活性。一旦进入细胞后,二价铜离子(Cu2+)被还原为一价铜离子(Cu+),并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后,Zeocin?被活化,嵌入DNA使其断裂,最终导致细胞死亡。
2.2 两种抗生素的应用差异
腐草霉素(Phleomycin)和Zeocin?都属于博莱霉素/腐草霉素(bleomycin/phleomycin)抗生素家族的成员,后者是对Phleomycin D1的商业名称。这两种抗生素都用作筛选抗生素,分子遗传学中用来携带腐草霉素抗性基因比如Sh ble基因的转染细胞。
腐草霉素(Phleomycin)与Zeocin?有效成分基本差不多,但有所差异,腐草霉素(Phleomycin)建议用于对Zeocin?敏感性比较差的细胞,比如:丝状真菌和某些酵母菌。